Результаты исследований

Результаты исследований эффективности гидрогеля «Суставит-Актив» в лечении суставов

«СУСТАВИТ-АКТИВ» И ГЛЮКОЗАМИН

Клинические испытания глюкозамина проводились:

в 1990г. Харьковским государственным фармацевтическим институтом,
в 1995г. Волгоградской государственной медицинской академией, Московским медицинским стоматологическим институтом им. Н.А. Семашко,
в 2000г. Институтом клинической экспертизы МЗ РФ.

По данным испытаний сделаны следующие общие выводы:

Лечение больных полиостеоартрозами с помощью глюкозамина позволяет существенно улучшить состояние этих больных.
У больных остеохондрозом позвоночника отмечено уменьшение болевого синдрома, увеличение объема движений позвоночника.
В результате лечения значительно уменьшаются или исчезают боли в покое и при движении в костях и суставах, уменьшаются показатели, характеризующие уровень болевых ощущений по данным визуально-аналоговой шкалы, уменьшаются боли при пальпации.
По данным сцинтиграфии скелета с Тс пирфотех у большей части больных происходит восстановление костно-хрящевых структур за счет улучшения минерального обмена.
Результатом нормализации минерального обмена по данным рентгенографии является восстановление плотности костной ткани.
Применение глюкозамина для лечения больных остеоартрозом не вызывает каких-либо существенных изменений со стороны картины крови, биохимии крови, иммунитета, за исключением реакций, говорящих о снижении процесса воспаления в хрящевой и соединительной ткани.
Глюкозамин не оказывает каких-либо заметных побочных реакций на больных с остеоартрозом в процессе лечения.
Переносимость препарата хорошая. При приеме внутрь и парентеральном введении глюкозамин не оказывает отрицательного воздействия на сон, не вызывает диспепсических и других осложнений со стороны желудочно-кишечного тракта.
Препарат следует широко рекомендовать для систематического лечения больных заболеваниями опорно-двигательного аппарата.

Предполагаемое длительное использование солей глюкозамина в виде порошка, таблеток и капсул для постоянного поддержания терапевтического эффекта обуславливает возможность появления побочного действия препарата. Растворы глюкозамина гидрохлорида имеют достаточно кислое значение рH-среды (от 3,5 до 4,5). В связи с этим больным, страдающим остеоартрозом и другими заболеваниями опорно-двигательного аппарата и имеющим повышенную кислотность желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), не всегда комфортно длительно применять глюкозамина гидрохлорид. Появление нарушений деятельности ЖКТ может приводить к отказу от приема порошка, таблеток и капсул, содержащих глюкозамина гидрохлорид. Исследования, проведенные в ПятГФА под руководством профессора Компанцева В.А., позволили предложить новую лекарственную форму, в которой предусмотрено снижение побочного действия глюкозамина гидрохлорида за счет его сочетания с пектином (растительным полимером).
В 2004г. научно-исследовательской группой во главе с профессорами Компанцевым В.А. и Компанцевой Е.В. предложен принципиально новый подход к применению глюкозамина. Глюкозамин предлагается применять в составе сложной формы с растительными полимерами и экстрактами полезных растений. При этом данный продукт не является фармакологическим средством, а предлагается потребителю в виде киселя (гидрогеля противоартрозного действия). Данный подход позволяет включать данную форму в комплексную терапию заболеваний опорно-двигательного аппарата, а так же в диетотерапию при аналогичных состояниях.
В процессе разработки состава прописи для приготовления гидрогеля противоартрозного действия были применены методы квантово - механического моделирования и прогнозирования внутрисистемного взаимодействия (образования активных комплексов). Полученные теоретически идеальные модели по составу и форме были проверены в биологическом эксперименте на лабораторных животных. Объектами исследования являлись гидрогель глюкозамина и глюкозамин.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ ГИДРОГЕЛЯ «СУСТАВИТ-АКТИВ»

Изучение хондропротекторного эффекта объектов исследования –гидрогеля «СУСТАВИТ-АКТИВ» и глюкозамина сульфата проводили на модели посттравматического артроза у собак. Посттравматический артроз развивался в тазобедренном суставе после нанесения стандартного дефекта в виде круглого отверстия диаметром 2 мм, проникающего через суставной хрящ в субхондриальную кость . Оценка клинических проявлений остеоартроза (ОА) у собак проводилось по следующим критериям: подвижность сустава, болезненность сустава, наличие местной воспалительной реакции.
Материалом для гистологического исследования служили головки бедренной кости, которые после отбора фиксировали в 10 % нейтральном формалине. Декальцинация проб проводилась в растворе 7,5% азотной кислоты в течение 7 дней.
Результаты исследований представлены на рисунках 1, 2, 3.

Влияние на подвижность сустава

При лечении гидрогелем «СУСТАВИТ-АКТИВ» и глюкозамином сульфатом было выявлено уменьшение хромоты и улучшение функциональной способности поврежденной конечности животных. Анализ подвижности сустава в контрольной группе животных и в группах, которым вводили гидрогель «СУСТАВИТ-АКТИВ» и глюкозамин сульфат в одинаковых дозах свидетельствует, что спустя 24 ч после нанесения травмы на головку бедренной кости существенным образом нарушается подвижность суставов у всех исследуемых животных. Применение гидрогеля «СУСТАВИТ-АКТИВ» и глюкозамина при остеоартрозе в течение недели способствует повышению подвижности поврежденного сустава. Анализ способности удерживания поврежденной конечностью о решетку при введении объектов исследования в течение 30 дней свидетельствует, что гидрогель «СУСТАВИТ-АКТИВ» также как и глюкозамин, практически восстанавливают подвижность травмированного сустава, в то время как у контрольных животных изучаемый показатель существенно отличался от нормальных величин (таблица 1).

Условные обозначения к рис. 1:
0 - отсутствие изменений в подвижности (животное удерживается на решетке поврежденной конечностью более 10 с);
“-” – уменьшение подвижности сустава;
-1 минимальные уменьшение подвижности сустава (животное удерживается на решетке поврежденной конечностью 10-7 с);
-2 – не выраженное ограничение подвижности (животное удерживается на решетке поврежденной конечностью 7-5 с);
-3- ограничение подвижности (животное удерживается на решетке поврежденной конечностью -5-3 с);
-4 существенное подавление подвижности (животное удерживается на решетке поврежденной конечностью менее 3 с);
-5 – подвижность практически отсутствует (животное не способно удерживаться на решетке поврежденной конечностью).

Анализ способности удерживания поврежденной конечностью о решетку при введении объектов исследования в течение 30 дней свидетельствует, что гидрогель «СУСТАВИТ-АКТИВ» также как и глюкозамин, практически восстанавливают подвижность травмированного сустава, в то время как у контрольных животных изучаемый показатель существенно отличался от нормальных величин.

Влияние на актопротекторную активность

При лечении гидрогелем «СУСТАВИТ-АКТИВ» и глюкозамином сульфатом было выявлено, что объекты исследования существенным образом удлиняют время нахождения животных на вращающемся стержне. Важно отметить, что исследуемые показатели более чем в 2,5 раза выше, по сравнению с животными контрольной группы (рис. 2).

Таким образом, курсовое применение гидрогеля при остеоартрозе способствует сохранению активности поврежденного сустава.

Влияние на анальгетическую активность

Анализ воздействия на порог болевой чувствительности гидрогеля и глюкозамина сульфата свидетельствует, что данные объекты исследования ограничивают болевую реакцию при остеоартрозе (рис. 3).

Обозначены статистически значимые сдвиги (Р < 0,05) по сравнению: *- c показателями до патологии.

Известно, что боль в суставе и клинически связанная с ним хромота является защитной реакцией организма для уменьшения нагрузки пораженной конечности и, уменьшение боли симптоматически (напрямую), безусловно, вредно для сустава. Но в тоже время, снижение болевых ощущений на фоне антиэкссудативного и антипролиферативного действия позволяет делать заключение, что снижение болевых ощущений при применении гидрогеля связано с противовоспалительной активностью биологически активных веществ, входящих в состав гидрогеля.

Противовоспалительное и ранозаживляющее действие

При изучении антиэкссудативных свойств у гидрогеля «СУСТАВИТ-АКТИВ», установлено, что он обладают способностью препятствовать развитию второй стадии воспаления – экссудации. Ограничение выраженности процесса экссудации также констатировали при введении глюкозамина сульфата (рис. 4).

Анализ данных, представленных в таблице 4 показал, что использование гидрогеля «СУСТАВИТ-АКТИВ» и глюкозамина эффективно ограничивает экссудативную фазу асептического воспаления (относительно контрольной группы животных), соответственно на 25,4% и 20,6 %. Известно, что антиэкссудативные свойства глюкозамина не уступают существующим нестероидным противовоспалительным препаратам: ацетилсалициловой кислоте, бутадиону и другим наиболее часто используемым препаратам.
Многочисленными исследованиями установлено, что тканевые изменения, сопровождающиеся развитие экспериментальной гранулем, во многом напоминают аналогичные процессы в соединительной ткани при хронических воспалительных заболеваний. Поэтому наблюдается хорошая корреляция между противовоспалительной активностью в эксперименте на моделях гранулем и клинической эффективностью лекарственных средств при заболеваниях соединительной ткани.
Количество грануляционной ткани, образующейся после имплантации стерильного шарика, является прямым критерием эффективности противовоспалительных средств, особенно для оценки их эффективности средств для лечения ревматических и системных заболеваний соединительной ткани. Поэтому представляло большой интерес оценить влияние гидрогеля на пролиферацию. Опытным путем установлено, что гидрогель и глюкозамин существенным образом тормозят пролиферативную стадию воспаления соответственно на 41,2 % и 19,2 %. Таким образом, антипролиферативное действие гидрогеля значимо превышает таковое глюкозамина. Антипролиферативное действия, которое выявлено было у гидрогеля, является ценным свойством, так как при заболеваниях опорно-двигательного аппарата у больных преобладает именно фаза пролиферации.
При сопоставлении ранозаживляющего эффекта объектов исследования установлено, что при применении гидрогеля и глюкозамина происходит статистически значимое увеличение сращения раны. В серии опытов с применением гидрогеля и ГА отмечено достоверное увеличение прочности сращения ран по сравнению с контролем, и выраженность этого сдвига составила в среднем на 34,5% и 35,4 % соответственно.
Анализ влияния гидрогеля на процесс воспаления и ранозаживления свидетельствует, что объект исследования ограничивает как экссудативную, так и пролиферативную фазы воспаления, а также активирует регенеративные процессы.

Оценка воздействия на антиоксидантный статус

В настоящий момент установлено, что в прогрессировании остеоартроза большое значение играет патологическое свободно-радикальное окисление. Поэтому важным аспектом исследования является оценка воздействия на процессы ПОЛ и активность ферментов антиоксидантной защиты – СОД и каталазы.
Экспериментально установлено, что курсовое применение гидрогеля при остеоартрозе ограничивает образование как первичных (гидроперекиси липидов, ДК), так и вторичных процессов ПОЛ (МДА), что связано с более выраженной активностью ферментов антиоксидантной защиты при применении средств, содержащих глюкозамин –рисунки 5.

Рисунки 5 - Динамика показателей антиоксидантного статуса

Иммунологические показатели

Важное диагностическое значение имеет при заболеваниях соединительной ткани количественное определение концентрации реактивного белка -СРБ. Повышение концентрации С-реактивного белка является признаком заболевания, а эффективная терапия проявляется снижением концентрации, т.е. Уровень С-реактивного белка отражает интенсивность воспалительного процесса.
Экспериментально установлено, что курсовое введение гидрогеля и глюкозамина препятствует развитию воспалительного процесса, о чем свидетельствует концентрация С-реактивного белка менее 1,55 мг/%. О менее выраженных иммунологических нарушениях в опытных группах животных по сравнению с контрольной свидетельствует и более выраженное снижение в крови ЦИК чем у животных контрольной группы – рис. 6.

Рисунок 6- Иммунологические показатели

Макроскопическое исследование бедренной головки

В контрольной группе животных с посттравматическим остеоартрозом макроскопически в головке бедренной кости четко определялось углубление. При осмотре хряща вблизи места дефекта выявлено, что он тусклый, имеет желтоватый оттенок.
В группах животных, которым вводили глюкозамин и гидрогель, макроскопически в головках бедренных кости место дефекта определялось с трудом – в виде беловатого пятна, несколько менее блестящего, чем остальная поверхность хряща, которая имела голубой оттенок. На остальной территории суставной хрящ был в основном блестящим, лишь на небольших участках определялись вкрапления желтоватого цвета.

Микроскопическое исследование бедренной головки

Контрольная группа животных

В контрольной группе животных зона дефекта во всех случаях была выстлана слоями клеточно-волокнистой ткани различной толщины и клеточности, которые не достигали уровня хрящевого покрытия головки. Края дефекта со стороны суставного хряща неровные, без клеток, толщина хряща резко снижена. Как вблизи дефекта, так и на расстоянии от него обнаруживаются трещины, щели, участки разрушенного хряща с резко измененной цитоархитектоникой, базальная линия вблизи дефекта была нарушена, костные балки истончены, костно - мозговые полости ниже зоны повреждения заполнены клеточно - волокнистной тканью. Коллагеновые волокна в дефекте плотно упакованы, между ними определяется большое количество удлиненных клеток фибропластического ряда с гиперхромными ядрами и базофильной цитоплазмой.
Наряду с дистрофическими изменениями в субхондриальных отделах головки бедренной кости наблюдался репаративный процесс, что было связано с развитием хондроидной ткани в костно-мозговых полостях вблизи зон с бесклеточным хрящом, либо вблизи трещин и щелей. В таких участках хондробласты располагались беспорядочно, были с большими гиперхромными ядрами и базофильной цитоплазмой. Межклеточное вещество окрашивалось оксифильно. При нарушении целостности базофильной линии, под участками с бесклеточным хрящом обнаруживались тяжи клеточно-волокнистой ткани. Необходимо отметить, что участки хряща с сохраненной цитоархитекторной и хондроцитами, с характерной для нормы строением, занимали незначительные территории.

Животные, получавшие гидрогель

При применении гидрогеля после моделирования остеоартроза в течение 30 дней установлено, что на 30 сут. в латеральном мыщелке преобладали репаративные процессы – разрастание гиалиновой хрящевой ткани в зоне дефекта, гиперплазия хондроцитов вблизи этой зоны, активация остеогенеза в участках, прилежащих дефекту со стороны субхондриальной кости. В костной ткани, расположенной ниже эпифизарного хряща, изменений не выявлено. Вблизи зоны дефекта почти во всех препаратах определялись обширные разрастания тяжей молодой хрящевой ткани, которая располагалась в костно-мозговых полостях субхондральной кости. Непосредственно под бесклеточным суставным хрящом наблюдалась гиперплазия хондроцитов. На противоположной от дефекта части головки суставной хрящ был большей частью без изменений, однако в зонах, граничащих с бесклеточными, определялось нарушение цитоархитектоники и пикноз ядер хондроцитов. Целостность базофильной линии в этой части головки сохранялась.

Животные, которым вводили глюкозамин

Животным, которым проводили терапию глюкозамином отмечались признаки репаративного процесса, о чем свидетельствует разрастание гиалиновой хрящевой ткани в зоне дефекта, замещение матрикса бесклеточного суставного хряща молодым гиалиновым. Большая часть хрящевого покрытия имела характерную для интактного суставного хряща цитоархитектонику. Существенных деструктивных изменений в хряще в виде трещин и щелей не выявлено. Участки суставного хряща, ограничивающие дефект, в большей части случаев имели обычное строение, лишь единичные хондроциты были крупные с гиперхромными ядрами и большой базофильной цитоплазмой. Краевая поверхность дефекта выполненная хондроидной тканью, в подавляющем большинстве случаев она была ровная, образована рядом густо расположенных клеток. Лишь в некоторых случаях на этих участках обнаруживались углубления, выполненные волокнистой хрящевой тканью. Необходимо отметить, что в гистологических препаратах при применении глюкозамина, также как и при применении гидрогеля часто вблизи бесклеточных участков хряща наблюдалось разрастание молодой гиалиновой ткани, проникающей из костно-мозговых полостей субхондриальной кости через базофильную линию, нарушенную при травме. Эпифизарный хрящ и подлежащие к нему балки были без изменений.

Заключение по микроскопии

Анализируя полученные данные, следует отметить, что при введении гидрогеля, так же как и при применении глюкозамина, на 30 сутки в головке бедренной кости преобладают репаративные процессы - разрастание гиалиновой хрящевой ткани в зоне дефекта, замещение матрикса бесклеточного суставного хряща молодым гиалиновым, активация остегенеза в участках прилежащих к дефекту. Следовательно, использование гидрогеля, содержащего глюкозамин, оказывает выраженное хондропротекторное действие, стимулирует биосинтетические процессы в хондроцитах, способствует формированию матрикса суставного хряща и стимулирует остеогенез.